抗原修復鍋進行抗原熱修復的方法分析
抗原修復鍋修復方法的優(yōu)點是暴露抗原決定簇的效果較好，結(jié)果穩(wěn)定，受環(huán)境條件影響小（特別適合于高原地區(qū)），可重復性高，是一個理想的修復方法；但對于組織處理不佳的切片，容易脫片；同時用高pH值的抗原修復液會引起細胞核的碎裂和非特異性的增加，因此，盡量避免使用高pH值的抗原修復液（EDTA、EGTA），建議采用pH6.0的檸檬酸抗原修復液。
利用抗原修復鍋進行抗原熱修復的技術(shù)，具體方法是：
1、將盛有抗原修復液的修復鍋在電磁爐上加熱至沸騰。
2、將脫蠟至蒸餾水的切片置入抗原修復液中加蓋進行熱處理，當氣閥噴氣后計時1.5-3分鐘（噴氣時間的差異主要是因為后面冷卻的方法不同：噴氣時間1.5-2分鐘，采用自然冷卻法，切片還浸在高溫的液體內(nèi)20多分鐘，抗原在高溫下繼續(xù)修復，因此，可縮短噴氣的時間；而快速冷卻，抗原修復立即被中止，因此，噴氣時間一般為3分鐘）。
3、自然冷卻20分鐘至緩沖液37℃以下時拿出切片（超過這個溫度拿出，會導致切片由于高溫干燥，造成陰陽臉）；或?qū)?strong>抗原修復鍋置入冷水中降溫，待高壓鍋放氣后，打開鍋蓋，將自來水直接沖入鍋內(nèi)，使緩沖液溫度降至45℃以下后，取出切片。
4、洗3分鐘進行后進行免疫組織化學染色。
此外，要想做好抗原熱修復，也要注意產(chǎn)品的質(zhì)量。因此，選擇抗原修復鍋主要考慮以下兩點：
1.抗原的自然特性以及所選擇的抗體
抗原自身特性和抗原的位置都是首要考慮。我們建議你剛開始的時候選擇抗原表達環(huán)境的修復鍋。
2.固定液以及固定程度
建議的組織切片的抗原修復處理是一種針對普通的適化狀態(tài)切片。如果用來切片的組織塊沒有充分固定，或者過固定（留在福爾馬林溶液中時間過長），或者用了其它的固定液，那么，處理組織切片的流程方案需要重新修訂，便利的辦法是選擇使用G系列緩沖液。對于過固定的材料一般推薦用抗原修復鍋或者在同一修復鍋里面增加循環(huán)。
